DIA定量蛋白質組學

數據非依賴性采集( Data Independent Acquisition,DIA)定量技術,將整個質譜的掃描質量范圍分為若干窗口,依次對每個窗口的所有離子進行碎裂,采集全部子離子信息。利用業內頂尖的商業化DIA分析軟件Spectronaut比對預先建立的譜圖庫即可實現定性確證和定量離子篩選。DIA是一種真正全景式、高通量的質譜技術,大大提高了定量的重現性、穩定性和準確性,同時也可實現數據回溯分析。



DIA具有以下特點:???????

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?(1) 無歧視地獲得所有肽段的信息,不會造成低豐度蛋白信息的丟失,

(2) 循環時間固定,掃描點數均勻,定量準確度高,

(3) 肽段的選擇沒有隨機性,數據可以回溯,對于復雜蛋白樣本,特別是低豐度蛋 白具有更優異的重現性。

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與傳統質譜定量“金標準”選擇反應監測 / 多反應監測(SRM/MRM)相比,DIA具有以下特點:

(1) 無需提前指定目標 肽段,適用于未知蛋白分析;

(2) 無需優化方法,獲得數據后再基于譜圖庫實現定性確證和定量離子篩選;

(3) 通量無上限,適合大 規模蛋白定量分析。?????????

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數據非依賴采集(DIA):???????

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?? 采集所有離子及碎片譜圖,不丟失任何信息,重現性好;

? 數據易于追溯,即使目前的水平無法發現某些蛋白/ 化合物,未來可以回溯;

? 無需優化方法,對于易降解樣品可以即刻采集,獲得數據后再深入挖掘;

? 基于碎片離子(即母子離子對)定量,選擇性好,與 SRM/MRM 相當;

? 循環時間固定,掃描點數均勻,定量準確度高;

? 通量無上限,同時監測所有目標蛋白/ 化合物;

? 相同肽段不同翻譯后修飾位點的定量區分與辨別。


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