定量乙?;鞍踪|組分析

蛋白質的乙?;揎検窃谝阴;D移酶的作用下,蛋白質的賴氨酸殘基上添加乙?;倪^程,是細胞控制基因表達、蛋白質的活性或生理過程的一種機制。乙?;揎椆δ苤饕性趯毎旧w結構的影響以及對核內轉錄調控因子的激活方面 。

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技術流程



定量乙?;鞍踪|組分析?


樣品經Trypsin酶切,酶切產物由乙?;禺愋钥贵w(Cell Signaling Technology 13416S)進行乙?;亩蔚母患?,富集后由高精度質譜分析,分析數據由生物信息學軟件進行數據檢索。

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研究方法


定性:

利用純化乙?;孜锏目贵w富集并利用高通量質譜檢測,該方案具有高靈敏度和高特異性。


定量:

1.?????? iTRAQ定量:將iTRAQ技術和蛋白質修飾富集技術相結合,可以對2-8種生物樣本中的乙?;揎椷M行相對定量。

2.?????? 非標記(label-free)定量:將非標記定量技術應用于蛋白質翻譯后修飾的相對定量,無需昂貴的穩定同位素標記試劑但定量受樣本數量限制。

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樣品要求


樣品類型

樣品要求

植物葉片

濕重≥3g

植物根莖、木質部、韌皮部等

濕重≥5g

細胞樣品

細胞量濕重≥5*107

組織樣品

人、動物、微生物濕重≥50mg;

體液樣品

血清、血漿體積≥200μl,、腦脊液≥500μl,尿液≥1000μl




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