應用領域

促進人類健康和生命科學發展

二硫鍵配對分析
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方法簡介


二硫鍵是通過蛋白質中兩個半胱氨酸上的巰基氧化而形成的,是一種重要的蛋白質翻譯后修飾。在非還原狀態下,用IAA將蛋白質游離的Cys封閉,再分別用Trypsin、Chymotrypsin、Glu-C進行酶切,酶解產物通過質譜檢測后進行分析,通過匹配所得到的MS/MS圖譜,找出二硫鍵連接的肽段,確定二硫鍵的配對方式。


二硫鍵配對分析


樣品要求


關于樣品:請確保蛋白濃度大于1mg/ml, 最小量不得低于50Pmol,蛋白純度最好大于90%;含鹽量:揮發性無機鹽<20mM,不揮發性無機鹽<5mM;蛋白溶液避免SDS等變性劑,表面活性劑,或其它保護劑,不含tris緩沖體系。

樣品運輸:請使用足量的干冰運輸,并盡量選用較快的郵遞方式,以降低運輸過程中樣品降解的可能性。



案例分析


二硫鍵配對分析


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