應用領域

促進人類健康和生命科學發展

N糖基化位點分析
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方法簡介


一般發生N-糖基化位點修飾的蛋白質,均有基本的氨基酸結構骨架。N-糖基化位點鑒定通常使用PNGase F酶釋放糖鏈, 天冬酰胺(N)發生脫氨基化,為了避免天然脫氨基化造成的假陽性,在 18 O水中進行酶切, 使去糖基化位點含有一個18 O,形成+2.9890Da。通過高精度LC-MS/MS檢測脫糖后肽段,確認脫糖后分子量與理論分子量的變化以及糖基化修飾肽段的序列,從而確定蛋白質的糖基化位點。

N糖基化位點分析


樣品要求


關于樣品:至少需要20ug的蛋白質,純度>90% ;含鹽量:揮發性無機鹽<20mM,不揮發性無機鹽<5mM;蛋白溶液避免SDS等變性劑,表面活性劑,不含tris緩沖體系。

樣品運輸:請使用足量的干冰運輸,并盡量選用較快的郵遞方式,以降低運輸過程中樣品降解的可能性。


案例分析


N糖基化位點分析

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